紫河车的现代研究

  胎盘的成分较复杂.胎盘球蛋白制品中含有多种抗体, 在临床上长期用于被动免疫.人胎盘中含有干扰素(Interferon)以及巨球蛋白(称β-因子)。亦含有与血液凝固有关的成分:其中有类似凝 血因子Ⅻ的纤维蛋白稳定因子、尿激酶(Urokinase)物和纤维蛋白溶酶原活化物.人胎盘中含有的激素有:促性腺激素 A 和 B、催乳素、促甲状腺激素、催产素样物质、多种甾体激素如雌酮、雌二醇、雌三醇、孕甾酮、雄甾酮、去氧皮质甾酮、11-去氢皮质甾酮(化合物 A)、可的松(化合物 E)、17-羟皮质甾酮(化合物 F)等.人胎盘催乳素与人垂体生长素的化学结构相关,有免疫交叉反应, 在垂体切除大鼠与生长激素亦有明显的协同作用,因此也称为催乳素-生长激素.有报告认为, 胎盘催乳素有生长激素样作用;亦有报告指出,胎盘激素在垂体切除大鼠无生长激素样作用。人胎盘中还含有多种有应用价值的酶, 如: 溶菌酶(Lysozyme)、激肽酶(Kininase)、组胺酶(Histaminase)、催产素酶(Oxytocinase)等.另外还含有红细胞生成素、磷脂及多种多糖。从人胎盘的酸性抽提物中还得到较多量的松弛大鼠十二指肠和降大鼠血压的成分,其性质与前列腺素 E1(Prostaglandin E1)相同。 1.增强机体抵抗力作用人胎盘提取物, 给小鼠皮下注射,可使其游泳时间延长;给大鼠肌肉注射, 对利血平性、紧张性、结扎幽门下部等造成的实验性胃溃疡有一定的预防和治疗作用.给大鼠腹腔注射脱脂后胎盘的盐酸水解产物,对四氯化碳及乙硫基丁氨酸引起的肝脂肪沉着, 有明显的作用.胎盘粉给小鼠口服,能使其结核病变减轻, 而在试管中则反能促进结核杆菌的生长,故认为其作用主要在于增强机体抵抗力.2.抗感染作用胎盘γ-球蛋白含有干扰素, 可用于预防和控制病毒感染.胎盘γ-球蛋白还含有麻疹、流感等抗体及白喉抗毒素等,可用于预防和减轻麻疹等传染病,因胎盘γ-球蛋白系蛋白质, 故口服无效,必须注射.

  胎盘中含有的溶菌酶, 给小鼠腹腔注射,可防止小鼠因沙门菌、鼠伤寒沙门菌、弗氏痢疾杆菌的内毒素引起的死亡;但对大肠杆菌引起的内毒素血症无作用.

  3.激素样作用胎盘中可能含有绒毛膜促性腺激素、雌激素及孕激素成分, 因而具有这些激素的药理作用.但绒毛膜促性腺激素是蛋白质类物质,口服无效, 需要注射.胎盘提取物给哺乳期幼兔注射,似有促进其发育的作用, 并能显著促进胸腺、脾脏、子宫、、乳腺的发育,对甲状腺、等也有促进作用, 但对脑垂体、肾上腺、卵巢、胰腺、肝、肾等几乎无影响.

  4.对血凝的影响胎盘中含有尿激酶物,能尿激酶对纤维蛋白溶酶原的“活化”作用, 妊娠时纤溶活性降低与此有关.有报告指出,妊娠时子宫肌层中纤维蛋白溶酶原活化物与尿激酶物的比例为1∶3.4, 而胎盘中二者之比例则高达1∶1197。人胎盘中含有低量的凝血因子Ⅻ(一种糖蛋白),此种凝血因子不仅能稳定纤维蛋白凝块、促进创伤愈合, 在动物实验中还有抗组胺的作用.临床上可用来治疗因Ⅻ因子缺乏而引起的出血患者.

  5.其他作用在离体试验中,胎盘提取物能促进受心脏的恢复.在体外试验中, 人胎盘中的某种糖蛋白成分,能淋巴细胞中DNA的合成, 但不影响细胞的活力.胎盘提取物大量时能去氧麻黄碱引起的发热.

  用瓦氏呼吸器测知,冷藏胎盘的胃蛋白酶消化液、水提取液及70%丙酮提取物, 能促进肝、心、脑等数种组织的呼吸及酵母菌的呼吸,冷藏者较非冷藏者作用强.

  胎盘绒毛膜抽出液对癌症患者皮内反应较健康人为显著,有一定诊断价值, 可继续研究,提高其性.

  胎盘蛋白中含有“肾素样”的升压物质, 其调节血液循环的意义尚待进一步阐明. 抗感染作用

  胎盘γ-球蛋白含有麻疹、流感等抗体以及白喉抗毒素等,可用于预防或减轻麻疹等传染病。因系蛋白质,故口服无效,必须注射。胎盘γ-球蛋白中还含干扰素,临床上可用于预防或控制病毒感染。胎盘中还含有溶菌酶,可防止小鼠(腹腔注射)由肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、弗氏痢疾杆菌的内毒素引起的死亡;对内毒素对大鼠的也有一定的作用;但对大肠杆菌引起的内毒素血症无作用。

  给小鼠口服胎盘粉,能减轻其结核病变,而在试管中反能促进结核杆菌的生长,故认为其作用主要在于增加机体抵抗力。脱脂后胎盘的盐酸水解产物,给大鼠腹腔注射,对四氯化碳及乙硫基丁氨酸(Ethionin)引起的肝脂肪沉着,有明显的作用。给小鼠皮下注射人胎盘提取物,可使其游泳时间延长;对大鼠肌内注射,对某些实验类型(利血平性、紧张性、结扎幽门下部等)的实验性胃溃疡,也有一定的预防及治疗效果。

  胎盘在生理上能产生绒毛膜促性腺激素,对卵巢作用很小,但对则有兴奋作用;此外,也能产生雌激素及孕激素。胎盘中可能含有这些激素,因而具有这些激素的药理作用。绒毛膜促性腺激素是蛋白质类物质,口服无效,需要注射。哺乳期幼兔注射胎盘提取物似有促进其发育的作用,对胸腺、脾脏、子宫、、乳腺等能显著促进其发育,对甲状腺、等也有促进作用,对脑垂体、肾上腺、卵巢、胰腺、肝、肾等几无影响。

  胎盘中含有所谓尿激酶物,能尿激酶对纤维蛋白溶酶元的活化作用;此可解释妊娠时纤溶活性之降低。据测定,妊娠时子宫肌层中纤维蛋白溶酶元活化物与尿激酶物的比例为1∶3.4,而胎盘中二者之比例则高达1∶1197。人胎盘中含有低量的凝血因子Ⅻ(一种糖蛋白),因此可用来治疗因Ⅻ因子缺乏的出血患者。此种凝血因子不仅能稳定纤维蛋白凝块、促进创伤愈合,在动物实验中还有抗组织胺的作用。

  在离体试验中,胎盘提取物能促进受心脏的恢复。胎盘蛋白中,含有肾素样的升压物质,在血液循环的调节上,其意义尚待进一步阐明。人胎盘中尚含某种糖蛋白成分,在体外试验中,能淋巴细胞中DNA的合成,但不影响细胞的活力。胎盘提取物大量时能挪制去氧麻黄碱引起的发热。冷藏胎盘的胃蛋白酶消化液、水提取液及70%丙酮提取物用瓦氏呼吸器测知,能促进肝、心、脑等数种组织的呼吸及酵母菌的呼吸,冷藏者较非冷藏者作用强。胎盘血清对离体豚鼠子宫有兴奋作用,类似垂体后叶激素。胎盘绒毛膜抽出液对癌症患者皮内反应较健康人为显著,有一定诊断价值,可继续研究,提高其性。雌激素样作用:胎盘中含有多种酶系统,参与甾体激素的代谢,如对雌激素及黄体酮的代谢;胎盘尚分泌绒毛膜促性腺激素,有促进乳腺和女性生殖器官发育的功能。

  大鼠皮下注射人胎盘提取液3-6个月,体重的增加与对照组相比无明显差异,中等以上剂量应用到14天左右,则见震颤、竖毛、注射局部肿胀,对食欲、血及尿检查均未见异常。应用临床量的300倍以上,可见肝细胞萎缩、脂肪沉着及瘀血,肾近曲尿管上皮空泡化,脾血量增加,脑下垂体嗜酸细胞减少,皮肤水肿,结缔组织细胞及骨髓中细胞增加。应用临床量的150倍以下,则没有引起特殊变化。妊娠小鼠及大鼠皮下注射胎盘提取物没有致畸胎的作用。新生仔鼠的发育且超过对照组。胎盘(或连同脐带)的盐水浸出液给家兔静脉注射,可见呼吸困难、口唇青紫、大小便失禁、搐搦及间隙性痉挛而死亡。反复静脉注射有急速耐受现象,此有毒物质可因透析、吸着、消化等而消失。妊娠3-4个月的牛胎盘提取物,毒性很低,但无明显的药理作用。 紫河车中的γ球蛋白含有麻疹、流感等抗体及白喉抗毒素,其所含的干扰素能预防和控制多种病毒感染,因此,紫河车可用于预防流感、麻疹、肝炎等传染病的发生,对已感染的可以减轻其症状。在用于治疗水痘的疗效观察中,证明胎盘肽既具有免疫调节作用,也具有一定的抗病毒作用,是值得临床推广应用的生物制剂。魏氏等用胎盘调节肽治疗慢性活动性乙型肝炎,辅以维生素、护肝片、肌苷等,治愈 12 例,显效 52 例,好转 20 例,总有效率 91.3%;免疫指标迅速改善,植物血凝素(PHA)皮试红斑提高至 19.5mm,C3 由 10.7% 升高到 11.5%,IgG、IgA 都有不同程度的下降,而单纯用维生素及肌苷,免疫指标平均值改变不明显。这是通过免疫调节作用来达到抗病毒的目的。抗乙肝胎盘肽是自 HBsAb 阳性胎盘提取的一种性胎盘肽,用之治疗乙型肝炎的报道很多,例如何氏等在国家卫生部组织的Ⅱ期临床试验中,抗乙肝胎盘肽 4 mL 肌注,每日 1 次,3 个月后 HBeAg、HBV-DNA 阴转率分别为 53.6%、50%。又如商氏等对 78 例合并或不合并 HGV-RNA 阳性的慢性乙型肝炎患者应用抗乙肝胎盘肽治疗 4 个月,ALT 复常率、HBeAg、HBV-DNA 阴转率分别为 73.80%、58.97%、55.13%,且其中 25 例经治疗后肝脏病理变化均有明显改善。

  已经有人对胎盘活性因子(PAF)体外抗单纯疱疹病毒作用进行了研究,他们运用间接免疫荧光法检测药物抗病毒作用,实验结果表明,PAF 对细胞无毒、无害,而且有促进细胞生长的作用。PAF 不能封闭细胞表面的病毒受体,对病毒的吸附与穿入无干扰作用,但 PAF 对病毒有较明显的和直接杀伤作用。PAF 在一定的浓度和与病毒作用的最佳时间内,具有完全病毒感染的活性,细胞不受感染的作用。该实验更进一步证明了 PAF 含有β干扰素,故可病毒的复制。程氏通过胎盘体外培养的方法纯化出人层干扰素,进行的抗体中和实验表明,抗 IFN-α 抗体显著其抗病毒活性,从而设想,人早期绒毛组织块在体外培养条件下所分泌的具有抗病毒活性的 IFN 样物质,对胎儿生长与发育必定具有一定的生理作用。ω干扰素(IFN-ω)与层蛋白的同源性可高达 70%~80%。因此二者具有一定的联系。国外有人应用含新鲜 250 U/mL 的 INF-ω、INF-α2或IFN-γ 的培养基,培养含部分 HBsAg 基因组的 PLC/PRF/5 细胞,分别在培养 24、48、72 h后,用 ELISA 法检测 HBsAg 表达水平。结果显示:INF-ω 与INF-α2对 HBsAg 表达的作用相似。二者抗原合成方面明显相似,在治疗方面具有较好的应用前景。

  紫河车抗病毒作用机理一方面是直接或杀伤病毒,另一方面是通过调节人体免疫系统达到抗病毒目的。张氏等的研究表明,自 HBVM-Ag 阳性、HBVM-Ab 阳性胎盘提取的转移因子注射至小白鼠后,小白鼠外周血淋巴细胞明显增多,胸腺重量和胸腺指数亦明显增加,进而脂酶染色证明 75% 属 T-样淋巴细胞,25% 属 Thy-样淋巴细胞。此外,通过一系列试验证明了胎盘转移因子(PSTF)对 HBV 具有免疫活性,阳性供体可将 PSTF 的免疫活性转移给阴性受体。王氏等观察了人胞注射液对正常小鼠与羊红细胞(SRBC)免疫小鼠免疫功能的影响。结果表明,人胞注射液能促进正常机体脾脏生长生育,增强脾脏免疫功能,增强巨噬细胞及 T 细胞的活力,提高机体非性免疫功能及细胞免疫功能;人胞注射液能增强 SRBC 免疫小鼠的体液免疫功能,增强 IgM 型抗体产生,提高机体抗病能力,起到扶正祛邪作用。 1.治疗支气管哮喘:取健康产妇之胎盘,洗净后低温干燥,研成细末或制成丸剂备用。每日6-12g,分3次饭后服。试治2例,均获近治愈。另有用胎盘血行注射者,取穴:膺窗、肺俞(主穴)、天突、膻中、足三里、三阴交(配穴)。每次选用3-4个,每穴0.5ml,每日或隔日注射1次。如诉局部疼痛,可在1.6ml胎盘血中加0.25%普鲁卡因0.4ml,分注4个。试治8例,7例有效;复发再用仍有效。

  2.治疗慢性气管炎:用新鲜胎盘制成20%蒸馏液,每日肌注1次,每次2ml,10天为一疗程。治疗久病体弱、经其他方疗不效而反复发作之患者47例,结果近愈17例,显效24例,好转6例。对咳、痰、喘都有一定的疗效,患者体质也有不同程度的增强。未见副作用。

  3.治疗皮肤溃疡:取新鲜胎盘按无菌操作冲击血块,除去胎膜,剪成1-2mm3的小块,浸入无菌生理盐水中,置于1-4℃冰箱内,翌日即可用于种植创面。用法:清创后将胎盘组织平铺干上,包扎固定。如系下腿溃疡,则自足尖至膝部用弹力绷带缠绕。1星期后如胎盘干燥结痂,或痂面潮湿而局部无压痛及分泌物,则2-3星期即可痊愈。如种植失败, 1星期后可再次施行。治疗30例,经1-2次种植后22例痊愈,4例进步,4例无效。据观察,面愈合与局部血循环有重要关系,血液循环不良者治愈率低。

  4.治疗母乳缺乏症:内服紫河车粉,每次0.5-1.0g,每日3次。给药时间一般从产后第3天开始。共治57例,服药为 1-7天,以2-4天最多。结果服用 1天后见效者6人,2天见效者24人,3天见效者6人,4天见效者12人,5天见效者3人,6天见效者5人,7天见效者1人。 1.紫河车是人组织生物制剂,属于或待淘汰的药材

  紫河车属于组织生物制剂,原材料虽然取自健康产妇的胎盘,但该制剂中可能会有一些不易检测到的病原微生物。例如,有人报道青岛市各大医院正在使用的不同厂家或批号的人血丙种球蛋白和胎盘球蛋白 5 支中,抗 HCV 阳者 4 支,占 80%,且均呈强阳性反应,所以国家对之有一定的控制政策。这就使胎盘制剂的推广与应用受到一定。以上事实,就要求我们从胎盘中提取抗病毒有效成分,通过生物学技术将其分离、克隆,生产出一种新型的抗病毒药物。这将大大克服组织生物制剂的弊端。

  许多资料表明,HBsAg 阳性的孕妇,其 HBV 病毒可经胎盘屏障感染胎儿或者首先感染胎盘并在其中复制,再感染胎儿,所以其胎盘感染率很高。然而,实际上这些孕妇生出的新生儿 HBsAg 大都为阴性而阳性率较低。如果新生儿出生后立即注射乙肝疫苗,有 80%~91% 的人获得完全免疫。但如果不注射疫苗,HBsAg 阳性的孕妇所产婴儿大多数在 1 年内成为 HBsAg 阳性。对此有人认为是由于母体抗体的作用而推迟了 HBV 成分在新生儿体内的表达。但其他研究则表明母体抗 HBc 抗体并不能 HBV 抗原在新生儿体内的表达及复制。朱宇同教授根据此现象提出,胎盘可能分泌一种 HBV 因子,在孕期它可以胎儿体内 HBV 抗原的表达与复制,而在出生后这种因子很快从新生儿的血液与组织中消失。王复生等用原位杂交法测定乙肝阳性孕妇的胎盘组织 HBV-DNA,结果发现 HBV 对胎盘的感染率极高(100%),且蜕膜为主要侵入甚至复制的部位,而绒毛层(包括绒毛合体层、绒毛中轴结构、绒毛内血管及细胞)则无阳性信号,说明病毒未叶状绒毛。这表明可能有一种物质存在于绒毛层中,以病毒的入侵。根据以上事实及对层蛋白的研究资料,可以推测这种因子可能就是层蛋白它可能是胎儿免受宫内感染的重要原因之一。这一推测是否正确有待深入研究。

  对动物和人的层蛋白的研究较多,羊的层蛋白(oTP)抗病毒活性已经得到肯定。oTP 具有较高的抗病毒活性(2×108~3×108 U/mg),其与已知干扰素功能相似。从局部看,它的抗病毒活性对胎儿免遭病毒感染是有益的。还有报道认为,oTP 能抵抗羊慢病毒及人类免疫缺陷病毒,羊慢病毒间质性肺炎的发展。

  牛和羊的层蛋白核苷酸序列已经研究清楚。关于人的 TP 结构研究有了一定的进展。经查阅 Genbank 可知,有人已经于 1993 年报道了人的层蛋白 DNA 序列,这为深入研究层蛋白结构与功能奠定了基础。人们特别注意到 IFN-ω 不仅具有很高的抗病毒活性,而且在结构上还与动物层蛋白极为相似,因此进行了相关的研究,这提示我们有必要对 IFN-ω 与 TP 的结构或功能的联系给予高度重视。资料表明 IFN-ω 与 TP 属于不同干扰素家族。因此研究层蛋白与干扰素(尤其是 IFN-ω)的关系、分离与克隆层蛋白或 IFN-ω 是我们研究紫河车中抗病毒活性成分的关键性问题。

  20.世纪 90 年代以来,生物学技术得到了迅猛的发展。应用生物学的理论和技术,开展传统医药的研究,是发展传统中医药的重要途径之一。这对于推动中医药学术发展,促进医在更深层次上结合及实现中医的现代化必将产生深远的影响。在新药研制方面,国内外许多科学家将目光放在了中药材方面,试图从中能发现新的活性成分,新的单体,创造出新型药物。从这个意义上来说,我们用生物学知识来研究紫河车的抗病毒活性成分,并与临床实际相结合,将有利于该传统中药治疗功效的机理,促进该药的开发。